محیط کشت DMEM F12 بایوسرا (Biosera)

DMEM/F12 یک محیط کشت سلولی ترکیبی، استاندارد و بسیار پرکاربرد است که از تلفیق دو محیط کشت پایه تشکیل شده است:

• DMEM

• Ham’s F-12

این ترکیب، یک محیط کامل‌تر و متعادل‌تر را ایجاد می‌کند که برای رشد طیف وسیعی از سلول‌ها، به ویژه سلول‌های سخت‌پرور (Fastidious) ایده‌آل است.

کاربردهای اصلی محیط کشت DMEM/F-12

این محیط کشت به دلیل تطبیق‌پذیری بالا، در موارد زیر استفاده گسترده‌ای دارد:

1. کشت سلول‌های اپیتلیال و کلیوی: بسیاری از رده‌های سلولی اپیتلیال (مانند سلول‌های MDCK) و سلول‌های کلیوی (مانند HEK 293) در این محیط رشد بهتری دارند.

2. کشت سلول‌های بنیادی: DMEM/F12 پایه و اساس بسیاری از محیط‌های کشت تخصصی سلول‌های بنیادی، به ویژه سلول‌های بنیادی عصبی و سلول‌های بنیادی پرتوان القایی (iPSCs) است. در این موارد، معمولاً با افزودنی‌های خاصی مانند B-27 یا N-2 غنی می‌شود.

3. کشت سلول‌های سرطانی و ایجاد اوردوسر (Overexpression): به دلیل پشتیبانی خوب از متابولیسم سلولی، برای کشت بسیاری از رده‌های سلولی سرطانی و همچنین برای انتقال ژن (ترانسفکشن) و ایجاد سلول‌هایی که پروتئین خاصی را به مقدار زیاد بیان می‌کنند، استفاده می‌شود.

4. کشت کو-کالچر (Co-culture): هنگامی که دو یا چند نوع سلول مختلف را به طور همزمان کشت می‌دهند، DMEM/F12 می‌تواند یک محیط مشترک و مناسب برای تأمین نیازهای همه آنها باشد.

5. تحقیقات تمایز سلولی: از آن برای مطالعه تمایز سلول‌ها به رده‌های خاص (مانند تمایز سلول‌های بنیادی به سلول‌های عصبی یا استخوانی) استفاده می‌شود.

ترکیبات و ویژگی‌های کلیدی

علت محبوبیت DMEM/F12 به ترکیبات مکمل آن برمی‌گردد:

نتیجه: DMEM/F12 با داشتن طیف گسترده‌ای از مواد مغذی ضروری و غیرضروری، محیطی غنی و کامل فراهم می‌کند که نیاز به افزودن سرم جنین گاوی (FBS) را کاهش می‌دهد یا در برخی موارد (به ویژه در کشت سلول‌های بنیادی) حذف می‌کند.

نحوه آماده سازی و استفاده

معمولاً DMEM/F12 به صورت پودر یا محلول آماده (Ready-to-use) عرضه می‌شود.

1. افزودنی‌های ضروری:

   • سرم: معمولاً ۵ تا ۱۰ درصد سرم جنین گاوی (FBS) برای تامین فاکتورهای رشد و هورمون‌ها اضافه می‌شود. در کشت‌های تخصصی‌تر ممکن است از سرم‌های دیگر یا حتی شرایط عاری از سرم استفاده شود.

   • آنتی‌بیوتیک: برای جلوگیری از آلودگی باکتریایی، معمولاً پنی‌سیلین-استرپتومایسین (Pen/Strep) اضافه می‌شود.

   • عوامل ضدقارچ: در صورت نیاز، آمفوتریسین B یا دیگر عوامل اضافه می‌شوند.

2. شرایط کشت:

   • محیط کشت آماده شده با DMEM/F12 معمولاً需要在 انکوباتور سلولی با دمای ۳۷ درجه سانتی‌گراد، رطوبت ۹۵٪ و اتمسفر حاوی ۵٪ دی‌اکسید کربن (CO₂) نگهداری شود.

جمع‌بندی نهایی

به طور خلاصه، DMEM/F12 یک محیط کشت پایه، قابل اعتماد و بسیار پرکاربرد در آزمایشگاه‌های بیولوژی سلولی است که به دلیل ترکیبات کامل و متعادل خود، امکان کشت موفقیت‌آمیز انواع زیادی از سلول‌ها را فراهم می‌کند.